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OXOID 多粘菌素B药敏纸片
英文缩写: PB 浓度: 300ug
品牌:OXOID 货号:CT0044B
包装规格:50片×5支/盒,50片/支
执行标准:参照CLSI标准,此产品仅供科研。长期备货上百个品种。欢迎垂询!
OXOID 多粘菌素B药敏纸片用途:用于半定量琼脂扩散法实验法进行抗生素的敏感性检测。
主要成份:药敏实验纸片(扩散法)为6mm的滤纸片,纸片两面都清晰印有抗生素编码的缩写和剂量。
检验原理:将分离株的纯培养物接种到试验培养基上,再将纸片贴附到培养基表面,抗生素通过琼脂扩散,形成浓度梯度。培养后,测量纸片周围的抑菌圈,并与经测试的特定抗生素*的抑菌环大小比较,判断细菌对该抗生素的敏感性,借此筛选出可能适合使用的抗生素。
操作方法:
(1)将待检菌接种于普通营养琼脂平板,37℃培养16~18小时,然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落,悬于3ml生理盐水中,混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景,调整浊度与比浊管(0.5麦氏单位)相同。
(2)用无菌棉拭子蘸取菌液,在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面,反复几次,每次将平板旋转60度,后沿周边绕两圈,保证涂均匀。
(3)待平板上的水分被琼脂*吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面,纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片,每张纸片间距不少于24mm,纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。
(4)将平板反转,孵育18~24小时后取出,用游标卡尺测量抑菌圈直径,从平板背面测量较接近的整数毫米数并记录(附表5)。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长,进入抑菌环,磺胺药在抑菌环内出现轻微生长,这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。
2 注意事项:
(1)制备MH琼脂平板应用直径90mm平皿,在水平的实验台上倾注。琼脂厚为4±0.5mm(约25-30ml培养基),琼脂凝固后塑料包装放4℃保存,在5日内用完,使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。倾注平皿前应用pH计测pH值是否正确(pH应为7.3)。pH过低会导致氨基糖苷类,大环内酯类失效,而青霉素活力增强。
(2) 药敏纸片长期储存应于-20℃,日常使用的小量纸片可放在4℃,但应至于含干燥剂的密封容器内。使用时从低温取出后,放置平衡到室温后才可打开,用完后应立即将纸片放回冰箱内的密封容器内。 过期纸片不能使用, 应弃去。
(3) 不稳定药物如亚胺培南, 头孢克洛, 克拉维酸复合药等, 应冷冻保存, 在-40 ℃以下。
(4) 保证质控菌株不变异的简便方法,将新得到的冻干菌株接种含血的M-H平板复活。然后每株细菌接种10支高层琼脂管,放置冰箱保存。每月取出一支,传出细菌供常规用。待用剩至后一支,可传种在M-H平板上,再接种一批高层琼脂管备用。如此可保证原始菌种*接触抗菌素。